produkty

Biologická aktivita: BCIP (BCIP p-toluidin salt; X-fosfát p-toluidin salt) je chromogenní substrát pro kolorimetrickou detekci aktivity alkalické fosfatázy.

Shiga toxiny (Stxs) jsou produkovány enterohemoragickou Escherichia coli (EHEC), která způsobuje lidské infekce s často smrtelným výsledkem.Buněčné linie Vero, odvozené z ledviny africké zelené opice, představují zlatý standard pro stanovení cytotoxických účinků Stxs.Navzdory jejich globálnímu použití jsou znalosti o přesných strukturách glykosfingolipidů Stx receptoru (GSL) a jejich sestavení v lipidových raftech nedostatečné.Zde uvádíme komplexní strukturní analýzu GSL receptoru Stx a jejich distribuci na membrány odolné vůči detergentům (DRM), které byly připraveny z buněk Vero-B4 a použity jako ekvivalenty lipidových raftů.Identifikovali jsme globotriaosylceramid (Gb3Cer) a globotetraosylceramid (Gb4Cer) jako GSL receptory pro podtypy Stx1a, Stx2a a Stx2e pomocí detekce překrytí TLC v kombinaci s MS.Neobvyklý Stx receptor, globopentaosylceramid (Gb5Cer, Galβ3GalNAcβ3Galα4Galβ4Glcβ1Cer), který byl specificky rozpoznán (kromě Gb3Cer a Gb4Cer) Stx2e, byl plně strukturně charakterizován.Bylo zjištěno, že lipoformy GSL receptoru Stx obsahují hlavně ceramidové skupiny složené ze sfingosinu (dl8:1) a C24:0/C24:1 nebo C16:0 mastné kyseliny.Kromě toho společný výskyt s markery lipidového raftu, SM a cholesterolem, v DRM naznačoval asociaci GSL s membránovými mikrodoménami.Tato studie poskytuje základ pro další zkoumání funkčního dopadu Stx receptorů spojených s lipidovým raftem na poškození buněk Vero-B4 zprostředkované toxiny.