produkty

CTP:fosfocholin cytidylyltransferáza α (CCTα) je jaderný enzym, který katalyzuje krok omezující rychlost v CDP-cholinové dráze pro syntézu fosfatidylcholinu (PC).Lipidová aktivace CCTα vede k jeho translokaci do jaderného obalu a expanzi intranukleární membránové sítě nazývané nukleoplazmatické retikulum (NR) mechanismem zahrnujícím deformaci membrány.Jaderné laminy jsou také nutné pro stabilitu a proliferaci NR, ale není známo, zda je tato jedinečná struktura nebo nukleární lamina obecně nutná pro syntézu PC.Aby se prozkoumal tento vztah, byla jaderná lamina vyčerpána RNAi nebo narušena expresí Hutchinson-Gilfordova syndromu progerie (HGPS) mutantního laminu A (progerin) a byl analyzován účinek na metabolismus CCTα a cholinu.siRNA-zprostředkované umlčení laminu A/C nebo laminu B1 v CHO buňkách za účelem snížení NR nemělo žádný vliv na syntézu PC, zatímco dvojitý knockdown nespecificky inhiboval dráhu.Potvrzuje jeho malou roli v syntéze PC, pouze 10 % přechodně nadměrně exprimované cholin/ethanolamin fosfotransferázy bylo detekováno v NR.V buňkách CHO byl CCTα nukleoplazmatický a lokalizovaný společně s GFP-progerinem v jaderných záhybech a invaginacích;fibroblasty HGPS však vykazovaly abnormální distribuci CCTα v cytoplazmě a jaderném obalu, která byla doprovázena dvojnásobným snížením syntézy PC.Navzdory jeho změněné lokalizaci experimenty se značením cholinem ukázaly, že aktivita CCT nebyla ovlivněna a inhibice syntézy PC byla sledována jako snížená aktivita cholinového transportéru citlivého na hemicholinium.Došli jsme k závěru, že CCTα a laminy specificky spolupracují na vytvoření NR, ale celková struktura jaderného obalu má minimální dopad na aktivitu CCT a syntézu PC.