produkty

Vyvinuli jsme nový systém dodávání malé interferující RNA (siRNA) využívající ternární komplex s polyethyleniminem (PEI) a kyselinou γ-polyglutamovou (γ-PGA), který vykazoval umlčující účinek a žádnou cytotoxicitu.Binární komplexy siRNA s PEI měly přibližně 73-102 nm ve velikosti částic a 45-52 mV v ζ-potenciálu.Umlčovací účinek komplexů siRNA/PEI se zvýšil se zvýšením PEI a komplexy siRNA/PEI s poměrem náboje vyšším než 16 vykazovaly významné snížení luciferázy v buněčné linii myšího karcinomu tlustého střeva pravidelně exprimující luciferázu (buňky Colon26/Luc).V komplexu siRNA/Lipofectamine a komplexu siRNA/PEI16 však byla pozorována silná cytotoxicita a krevní aglutinace.Nabíjení kationtových komplexů aniontovou sloučeninou bylo hlášeno jako slibná metoda pro překonání těchto toxicit.Proto jsme připravili ternární komplexy siRNA s PEI (poměr náboje 16) přidáním y-PGA pro snížení cytotoxicity a dodání siRNA.Jak se očekávalo, cytotoxicita ternárních komplexů se snížila se zvýšením obsahu γ-PGA, což snížilo ζ-potenciál komplexů.Silný umlčovací efekt srovnatelný s komplexem siRNA/Lipofectamine byl objeven v ternárních komplexech včetně γ-PGA s aniontovým povrchovým nábojem.Vysoká inkorporace ternárních komplexů do buněk Colon26/Luc byla potvrzena fluorescenční mikroskopií.Po dosažení knockdownu exogenně transfekovaného genu byla v buňkách B16-F10 hodnocena schopnost komplexu zprostředkovat knockdown endogenního provozního genu, glyceraldehyd-3-fosfátdehydrogenázy (GAPDH).Ternární komplex (komplex siRNA/PEI16/y-PGA12) vykazoval významný knockdown efekt GAPDH.Vyvinuli jsme tedy užitečný systém pro dodávání siRNA.