produkty

PIPES [piperazin-N,N′-bis(2-ethansulfonová kyselina)] se často používá jako pufrovací činidlo v biochemii.Je to pufr kyseliny ethansulfonové vyvinutý Goodem et al.v 60. letech 20. století.PIPES má pKa blízko fyziologického pH, což je užitečné při práci s buněčnými kulturami.Bylo prokázáno, že minimalizuje ztráty lipidů při pufrování histologie glutaraldehydu v rostlinných a živočišných tkáních. Pufrovací činidlo s pKa blízko fyziologickému pH.

Antimikrobiální peptid magainin 2 tvoří póry v lipidových membránách a indukuje membránovou permeaci buněčného obsahu.Ačkoli je tato permeace pravděpodobně hlavní příčinou jeho baktericidní aktivity, mechanismus tvorby pórů zůstává nedostatečně objasněn.Proto jsme podrobně zkoumali interakci magaininu 2 s lipidovými membránami pomocí jednoduchých obrovských unilamelárních vezikul (GUV).Vazba magaininu 2 na lipidovou membránu GUV zvýšila frakční změnu v oblasti membrány, δ, která byla úměrná povrchové koncentraci magaininu 2, X. To ukazuje, že rychlostní konstanta dvou látek indukovaných magaininem 2 -přechod stavu z neporušeného stavu do stavu pórů se značně zvýšil se zvýšením δ.Napětí lipidové membrány po aspiraci GUV také aktivovalo tvorbu pórů indukovanou magaininem 2.Pro odhalení umístění magaininu 2 byla zkoumána interakce karboxyfluoresceinem (CF)-značeného magaininu 2 (CF-magainin 2) s jednotlivými GUV obsahujícími ve vodě rozpustnou fluorescenční sondu, AF647, pomocí konfokální mikroskopie.Při absenci napětí v důsledku aspirace se po interakci magaininu 2 intenzita fluorescence GUV ráfku díky CF-magaininu 2 rychle zvýšila na ustálenou hodnotu, která zůstala konstantní po dlouhou dobu, a po 4-32 s před počátek úniku AF647 intenzita ráfku začala rychle narůstat na další ustálenou hodnotu.Naproti tomu v přítomnosti napětí nebylo pozorováno žádné zvýšení intenzity ráfku těsně před začátkem úniku.Tyto výsledky ukazují, že magainin 2 se nemůže translokovat z vnější do vnitřní monovrstvy, dokud těsně před tvorbou pórů.Na základě těchto výsledků jsme dospěli k závěru, že póry indukované magaininem 2 jsou póry aktivované natažením a natažení vnitřní monovrstvy je hlavní hnací silou tvorby pórů.