produkty

Tato studie popisuje jednoduchou a účinnou metodu využívající vysokoúčinnou kapalinovou chromatografii (HPLC) spojenou s fluorescenční detekcí pro stanovení kinetických parametrů vychytávání glutamátu v nervové tkáni.Tkáň sítnice získaná od 7denních kuřat byla inkubována se známými koncentracemi glutamátu (50-2000 uM) po dobu 10 minut a byly měřeny hladiny neurotransmiteru derivatizovaného o-ftaldehydem (OPA) v inkubačním médiu.Vyhodnocením rozdílu mezi počáteční a konečnou koncentrací glutamátu v médiu byl charakterizován mechanismus saturovatelného příjmu (K(m)=8,2 a V(max)=9,8 nmol/mg proteinu/min.).Toto měření bylo do značné míry závislé na sodíku a teplotě, což silně podporovalo, že mechanismus snižování koncentrace je skutečně přijímán vysokoafinitními transportéry.Kromě toho naše výsledky také ukázaly, že chlorid zinečnatý (inhibitor glutamátových/aspartátových transportérů) vyvolal na koncentraci závislý pokles absorpce glutamátu, což prokazuje specifičnost naší metodologie.Celkově tato práce charakterizuje alternativní metodologii hodnocení příjmu glutamátu v nervové tkáni pomocí HPLC.Tento přístup by mohl být důležitým nástrojem pro studie spojené s charakterizací drobných změn v transportu glutamátu souvisejících s poškozením centrálního nervového systému.