produkty

1.Metody profilování metabolitů jsou důležitými nástroji pro měření zásob metabolitů v biologických systémech.Zatímco většina metod profilování metabolitů uvádí relativní intenzity nebo závisí na několika vnitřních standardech představujících všechny metabolity, konečným požadavkem pro kvantitativní popis zásoby metabolitů v biologických buňkách a tekutinách je stanovení absolutní koncentrace.Uvádíme zde vysoce výkonnou a citlivou plynovou chromatografii/tandemovou hmotnostní spektrometrii (GC/MS/MS) cílenou metodu profilování metabolitů umožňující absolutní kvantifikaci všech detekovaných metabolitů.Metoda je založena na derivatizaci methylchlorformiátu a kvantifikaci přidáním vzorků standardy metabolitů odděleně derivatizovanými deuterovanými derivatizačními činidly.Tradiční ionizace dopadem elektronů je nahrazena pozitivní chemickou ionizací, protože ta v mnohem větší míře zachovává molekulární ion a další fragmenty s vysokou molekulovou hmotností.To usnadnilo výběr jedinečných přechodů MS/MS mezi mnoha společně eluujícími metabolity.V současné době nová metoda GC/MS/MS zahrnuje 67 běžných primárních metabolitů, z nichž většina patří do skupin amino a neaminových organických kyselin.Použitelnost metody ukazujeme na vzorcích moči a séra.Metoda je významným vylepšením současné metodiky pro kvantitativní profilování GC/MS metabolitů aminokyselin a neaminových organických kyselin.

2.24S-Hydroxycholesterol (24OHC) a 27-hydroxycholesterol (27OHC) jsou dva strukturálně podobné oxysteroly různého původu – první se tvoří téměř výhradně v mozku a druhý se tvoří v menší míře v mozku než ve většině ostatních orgánů.HYPOTÉZA K TESTOVÁNÍ: Poškození neuronů a/nebo demyelinizace způsobuje zvýšený tok 24OHC z mozku do mozkomíšního moku (CSF), zatímco defekt hematoencefalické bariéry způsobuje zvýšený tok 27OHC z oběhu do mozkomíšního moku. spektrometrie byla použita k testování dvou oxysterolů v CSF a plazmě od více než 250 pacientů s různými neurologickými a geriatrickými onemocněními. Hladiny CSF dvou oxysterolů byly mnohem více ovlivněny různými onemocněními než hladiny v plazmě.Pacienti s aktivním demyelinizačním onemocněním měli zvýšené hladiny 24OHC v CSF s relativně vysokým poměrem 24OHC/27OHC.Pacienti s meningitidou měli obecně vysoké hladiny obou steroidů s nízkým poměrem 24OHC/27OHC.Pacienti s Alzheimerovou chorobou měli mírně zvýšené hladiny 24OHC v CSF s menším zvýšením 27OHC.Pacienti s roztroušenou sklerózou měli tendenci mít vyšší hladiny 24OHC během aktivních období s vysokým poměrem 24OHC/27OHC. Měření dvou oxysterolů v CSF a plazmě může významně přidat ke stávajícím biochemickým metodám hodnocení neurologických onemocnění.