produkty

Deficit karbamoylfosfátsyntetázy 1 (CPS1) způsobený mutacemi CPS1 je vzácná autozomálně recesivní porucha cyklu močoviny způsobující hyperamonémii, která může vést ke smrti nebo vážnému neurologickému poškození.CPS1 katalyzuje tvorbu karbamoylfosfátu z amoniaku, hydrogenuhličitanu a dvou molekul ATP a vyžaduje alosterický aktivátor N-acetyl-L-glutamát.Klinické mutace se vyskytují v celé kódující oblasti CPS1, ale hlavně v jednotlivých rodinách, s malou recidivou.Charakterizovali jsme zde jedinou v současnosti známou recidivující mutaci CPS1, p.Val1013del, nalezenou u jedenácti nepříbuzných pacientů tureckého původu pomocí rekombinantního His-značeného divokého typu nebo mutantního CPS1 exprimovaného v systému bakulovirus/hmyzí buňky.Byla testována globální reakce CPS1 a parciální reakce syntézy ATPázy a ATP, které odrážejí kroky fosforylace hydrogenuhličitanu a karbamátu.Zjistili jsme, že CPS1 divokého typu a V1013del mutant vykazovaly srovnatelné úrovně exprese a čistotu, ale mutant CPS1 nevykazoval žádné významné zbytkové aktivity.Ve strukturním modelu CPS1 patří V1013 k vysoce hydrofobnímu β-vláknu uprostřed centrálního β-listu subdomény A karbamátové fosforylační domény a je blízko předpokládaného karbamátového tunelu, který spojuje obě fosforylační místa.Studie haplotypů naznačovaly, že p.Val1013del je zakladatelská mutace.Závěrem, mutace p.V1013del inaktivuje CPS1, ale nečiní enzym hrubě nestabilním nebo nerozpustným.Recidiva této konkrétní mutace u tureckých pacientů je pravděpodobně způsobena efektem zakladatele, který je v souladu s častou konangvinitou pozorovanou u postižené populace.