X-GAL CAS:7240-90-6 98% bílý až téměř bílý krystalický prášek
| Katalogové číslo | XD90008 |
| jméno výrobku | X-Gal (5-brom-4-chlor-3-indolyl-beta-D-galaktopyranosid) |
| CAS | 7240-90-6 |
| Molekulární vzorec | C14H15BrClNO6 |
| Molekulární váha | 408,63 |
| Podrobnosti o úložišti | -2 až -6 °C |
| Harmonizovaný celní kód | 29400000 |
Specifikace produktu
| Vzhled řešení | Čirý, bezbarvý až světle žlutý roztok (50 mg/ml v DMF:MeOH, 1:1) |
| Specifická optická rotace | -61,5 +/- 1 |
| Vzhled | Bílý až téměř bílý krystalický prášek |
| Čistota HPLC | min 99 % |
| Rozpustnost (5 % v DMF) | Rozpustný (5 % w/v, DMF) |
| Voda KF | max 1 % |
| Test (HPLC na bezvodé bázi) | min 98 % w/w |
Použití X-gal
X-gal (také zkráceně BCIG pro 5-brom-4-chlor-3-indolyl-β-D-galaktopyranosid) je organická sloučenina sestávající z galaktózy vázané na substituovaný indol.Sloučenina byla syntetizována Jeromem Horwitzem a spolupracovníky v roce 1964. Formální chemický název je často zkrácen na méně přesné, ale také méně těžkopádné fráze, jako je bromochloroindoxyl galaktosid.X z indoxylu může být zdrojem X v X-gal kontrakci.X-gal se často používá v molekulární biologii k testování přítomnosti enzymu, β-galaktosidázy, v místě svého obvyklého cíle, β-galaktosidu.Používá se také k detekci aktivity tohoto enzymu v histochemii a bakteriologii.X-gal je jedním z mnoha indoxylových glykosidů a esterů, které poskytují nerozpustné modré sloučeniny podobné barvivu indigo v důsledku enzymaticky katalyzované hydrolýzy.
X-gal je analog laktózy, a proto může být hydrolyzován enzymem β-galaktosidázou, který štěpí β-glykosidickou vazbu v D-laktóze.X-gal po štěpení β-galaktosidázou poskytuje galaktózu a 5-brom-4-chlor-3-hydroxyindol-1. Ten pak spontánně dimerizuje a je oxidován na 5,5'-dibrom-4,4'-dichlor -indigo - 2, intenzivně modrý produkt, který je nerozpustný.Samotný X-gal je bezbarvý, takže přítomnost modře zbarveného produktu lze proto použít jako test na přítomnost aktivní β-galaktosidázy.To také umožňuje použití bakteriální β-galaktosidázy (takzvané lacZ ) jako reportér v různých aplikacích.
Ve dvouhybridní analýze může být p-galaktosidáza použita jako reportér k identifikaci proteinů, které spolu interagují.V této metodě mohou být genomové knihovny testovány na proteinovou interakci pomocí kvasinkového nebo bakteriálního systému.Tam, kde existuje úspěšná interakce mezi testovanými proteiny, povede to k navázání aktivační domény na promotor.Pokud je promotor navázán na gen lacZ, produkce β-galaktosidázy, která má za následek tvorbu modře pigmentovaných kolonií v přítomnosti X-gal, bude tedy indikovat úspěšnou interakci mezi proteiny.Tato technika může být omezena na screeningové knihovny o velikosti menší než přibližně 106. Úspěšné štěpení X-gal také vytváří znatelně nepříjemný zápach v důsledku těkání indolu.
Protože X-gal je sám o sobě bezbarvý, lze přítomnost modře zbarveného produktu použít jako test na přítomnost aktivní β-galaktosidázy.
Tato snadná identifikace aktivního enzymu umožňuje použití genu pro βgalaktosidázu (gen lacZ) jako reportérového genu v různých aplikacích.
