produkty

Aktivátory karboanhydrázy: první aktivační studie lidské sekreční izoformy VI s aminokyselinami a aminy.

Sekreční isozym lidské karboanhydrázy (hCA, EC 4.2.1.1), hCA VI, byl klonován, exprimován a purifikován v bakteriálním expresním systému.Kinetické parametry pro hydratační reakci CO(2) prokázaly, že hCA VI má ak(cat) 3,4 x 10(5)s(-1) a k(cat)/K(M) 4,9 x 10(7)M (-1)s(-1) (při pH 7,5 a 20 stupních C).hCA VI má významnou katalytickou aktivitu pro fyziologickou reakci, řádově stejné jako všudypřítomná izoforma CA I nebo transmembránový izoenzym CA IX asociovaný s nádorem.Ukázalo se, že řada aminokyselin a aminů působí jako aktivátory CA VI s různou účinností.l-His, l-Trp a dopamin vykazovaly slabé aktivační účinky CA VI (K(A)s v rozmezí 21-42 mikroM), zatímco d-His, d-Phe, l-DOPA, l-Trp, serotonin a některé pyridyl-alkylaminy byly lepšími aktivátory, s K(A)s v rozmezí 13-19 mikroM.Nejlepšími aktivátory CA VI byly l-Phe, d-DOPA, l-Tyr, 4-amino-l-Phe a histamin s K(A)s v rozmezí 1,23-9,31 mikroM.Všechny tyto aktivátory zesilují k(cat), nemají žádný vliv na K(M), účastní se tedy kroku určujícího rychlost v katalytickém cyklu, reakcích přenosu protonů mezi aktivním místem enzymu a prostředím.